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BioDynamics DE110說明書

更新時(shí)間：2018-09-05 點(diǎn)擊次數(shù)：2017

上海起發(fā)為BioDynamics特約經(jīng)銷商，BioDynamics實(shí)驗(yàn)室公司成立于1999年，開發(fā)用于生物研究的試劑和試劑盒。

來自嗜冷細(xì)菌的堿性磷酸酶

Alkaline Phosphatase from psychrophilic bacterium

來自嗜冷菌Shewanella sp。的堿性磷酸酶。SIB1（PAP）具有BAP和CIAP的優(yōu)點(diǎn)。

	來自嗜冷菌Shewanella sp。的堿性磷酸酶。SIB1（PAP）可以很容易地作為SAP和CIAP進(jìn)行熱滅活。另一方面，即使通過苯酚提取，BAP也不容易失活。請(qǐng)參考這個(gè)地方
	因?yàn)槊冈?0℃下的活性是在37℃下的活性的約4倍，所以酶不僅可以從突出的3'端除去磷酸鹽，而且可以在60℃下從鈍端或凹入的5'端除去30分鐘。（另一方面，SAP和CIAP在60°C時(shí)迅速失活。）

DynaZyme

碼	產(chǎn)品名稱
DE110	來自Shewanella.sp的堿性磷酸酶（PAP）。SIB1

PAP的優(yōu)點(diǎn)
盡管BAP難以滅活，但PAP很容易被熱滅活。

如下圖所示，PAP處理在平板上產(chǎn)生比轉(zhuǎn)化后的BAP處理更多的白色菌落。因?yàn)榛钚訠AP在滅活處理后存活，活性BAP在連接反應(yīng)期間除去插入DNA的磷酸鹽并導(dǎo)致連接效率降低。實(shí)驗(yàn)表明，PAP在結(jié)扎前很容易滅活，但不能在BAP中滅活。為了在BAP處理后獲得足夠量的白色菌落，插入DNA必須以高插入量：載體比例加入到ligaton反應(yīng)中以克服存活的BAP或必須進(jìn)行兩次以上的苯酚提取。

將1μgEcoRI切割的pBluescript SK（+）載體用0.5單位BAP或5單位PAP在37℃去磷酸化。去磷酸化后，將反應(yīng)混合物處理如下，

	1。	未處理：將反應(yīng)混合物直接用于連接反應(yīng)。
	2。	苯酚：向反應(yīng)混合物中加入等體積的苯酚并將其渦旋30秒。然后用yi醚萃取混合物，并用乙醇沉淀。將沉淀物干燥并用dH ₂ O 溶解。將其用于連接反應(yīng)。
	3。	加熱：反應(yīng)混合物僅在95℃下加熱5分鐘用于PAP，或在100℃加熱5分鐘用于BAP。這些直接用于連接反應(yīng)。

在上述處理后，將EcoRI切割的去磷酸化的pBluescript SK（+）載體連接到1kb插入DNA片段上。用連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化感受態(tài)XL1-Blues。白色菌落的數(shù)量如圖所示。

DNA Size Marker
	DM112	DynaMarker® DNA Low D
	DM122	DynaMarker® DNA High D
	DM132	DynaMarker® for Plasmid D
	DM100	DynaMarker® DNA Small
	DM310	λHind III Marker

DNA Loading Dye
	DM210	6×BPB Loading Dye

New Type Colored Size Molecular Weight Marker
	DM253	DynaMarker® Prestain Marker for Small RNA Plus
	DM260	DynaMarker® Prestain Marker for RNA High
	DM270	DynaMarker® DIG Labeled Blue Color Marker for Small RNA

RNA Size Marker
	DM152	DynaMarker® RNA Low II
	DM157	DynaMarker® RNA Low II Easy Load
	DM160	DynaMarker® RNA High
	DM170	DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis
	DM180	DynaMarker® dsRNA
	DM185	DynaMarker® dsRNA Easy Load
	DM192	DynaMarker® Small RNA II
	DM197	DynaMarker® Small RNA II Easy Load

Protein Size Marker
	DM610	DynaMarker® Protein Eco
	DM625	DynaMarker® Protein BlueRed
	DM637	DynaMarker® Protein MultiColor III
	DM660	DynaMarker® Protein MultiColor Stable
	DM670	DynaMarker® Protein MultiColor Stable, Low Range
DynaZyme
	DE110	Alkaline Phosphatase
		from psychrophilic bacterium
DynaExpress
	DS610	Long ssDNA Preparation Kit
	DS620	Long ssDNA Preparation Kit
	DP100	ProteinChecker
	DS500	QuickBlue Staining Solution
Other reagents for molecular biology
	DR110	DEPC-treated Water, 1 ml Χ 5
	DR115	DEPC-treated Water, 50 ml Χ 2
	DR117	DEPC-treated Water, 500 ml
	DR120	RNase-free Water, non DEPC, 1 ml Χ 5
	DR125	RNase-free Water, non DEPC, 50 ml Χ 2
	DR127	RNase-free Water, non DEPC, 500 ml
	F012	DNA, Salmon Sperm, Sonicated
	F008	Anti-6 × Histidine Antibody

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是專業(yè)從事生物技術(shù)產(chǎn)品銷售的高科技企業(yè)，是國內(nèi)生物試劑、儀器、消耗品領(lǐng)域的企業(yè)之一。起發(fā)公司自成立以來，連續(xù)10年高速成長(zhǎng)。公司的發(fā)展目標(biāo)是建成專業(yè)從事生物技術(shù)產(chǎn)品銷售、生產(chǎn)與開發(fā)的公司。

上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司是實(shí)驗(yàn)試劑一站式采購服務(wù)商

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上海起發(fā)為BioDynamics特約經(jīng)銷商，BioDynamics實(shí)驗(yàn)室公司成立于1999年，開發(fā)用于生物研究的試劑和試劑盒。