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abeomics 17-1101說明書

更新時間：2022-09-26 點擊次數(shù)：1554

abeomics 17-1101說明書

螢光素酶報告基因檢測試劑盒

Leeporter™ 螢光素酶檢測試劑 - 1000 測試

產(chǎn)品編號：17-1101

應(yīng)用：

功能分析

數(shù)量：	1 個套件
內(nèi)容：	1000 次測試（96 孔板格式）。檢測緩沖液含有 0.01% 疊氮化納。
儲存情況：	儲存于 -20°C

Leeporter™ 螢光素酶檢測試劑經(jīng)過專門配制，可與表達(dá)優(yōu)化的細(xì)胞內(nèi)海腎螢光素酶的 Leeporter™（螢光素酶報告基因）細(xì)胞系一起使用，該細(xì)胞系旨在產(chǎn)生高度敏感的信號和延長的信號強(qiáng)度。作為一步發(fā)光檢測試劑，Leeporter™ 螢光素酶檢測試劑可以直接添加到與所使用的光度計兼容的細(xì)胞培養(yǎng)板中，無需稀釋或?qū)⑴囵B(yǎng)上清液或細(xì)胞裂解物轉(zhuǎn)移到其他板上。

協(xié)議：

1) 底物 (100X) 重構(gòu)：

將 0.5 ml 底物重構(gòu)溶液添加到凍干底物瓶中，通過輕輕上下吹打和/或倒置試管*溶解。重構(gòu)的 100X 底物可在 -20 o C 的黑暗環(huán)境中儲存長達(dá)一個月。

2) 檢測緩沖液：

在室溫水浴中解凍 50 ml 的檢測緩沖液，并通過旋轉(zhuǎn)和/或輕輕渦旋*溶解任何沉淀物，直到溶液變得澄清。Assay Buffer 可以分裝（例如每份 5-10 ml）并在 -20 o C 下保存數(shù)月。

3) 完整檢測溶液的制備（適用于 96 孔板格式）：

為每次使用新鮮制備完整的檢測溶液，應(yīng)在 2 小時內(nèi)使用。解凍檢測緩沖液并通過渦旋和/或溫和渦旋平衡至室溫。計算需要多少完整的測定溶液（注意：96 孔板的每個孔需要 50 ul 的完整測定溶液）。將適量的 Assay Buffer 分裝到 15 ml 試管中，并加入相應(yīng)量的重構(gòu) 100X 底物，制成最終的 1X 底物檢測溶液。

4) 螢光素酶檢測（96 孔板格式）：

1. 在白色實心底 96 孔微孔板（注意：使用的 96 孔板應(yīng)與正在使用的光度計兼容）中以 100 ul 細(xì)胞/孔，根據(jù)相應(yīng)的用于您的目標(biāo) Leeporter™ 細(xì)胞系的方案（注意：每個目標(biāo) Leeporter™ 細(xì)胞系方案都可以在其相應(yīng)的數(shù)據(jù)表中找到。）。[每孔總體積為 100 uL ]

2. 根據(jù)您的目標(biāo) Leeporter™ 細(xì)胞系的相應(yīng)方案刺激或處理您的目標(biāo)細(xì)胞。[每孔總體積變?yōu)?105~110 uL = 100 ul 細(xì)胞 + 5~10 ul 處理]

3. 完成目標(biāo)細(xì)胞的刺激/處理后，將含有待測目標(biāo)細(xì)胞的 96 孔板平衡至室溫 10 分鐘（注意：不要移除或擾亂細(xì)胞培養(yǎng)基。）。

4. 使用多道移液器，將 50 ul Complete Assay Solution 直接加入每個板孔中（注意：添加 Assay Reagent 時不要去除細(xì)胞培養(yǎng)基。所以 50 ul Assay Reagent 應(yīng)直接添加到孔上。每個孔的細(xì)胞培養(yǎng)。）。[每孔總體積變?yōu)?155~160 uL = 100 ul 細(xì)胞 + 5~10 ul 處理 + 50 ul 完整檢測溶液]

5. 使用 automix 2-3 秒，然后在 1-5 分鐘內(nèi)用光度計讀取板。（光度計設(shè)置示例：SpectraMaxL（Molecular Devices）：目標(biāo)波長為 470nm，積分時間為 0.5 秒，自動混合為 2 秒）。

僅供研究使用。不適用于診斷/治療程序。

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